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細胞簡介：

在嚴重創(chuàng)傷應激急性期，邊緣系統(tǒng)為應激應答敏感區(qū)，其功能和應激聯(lián)系密切，杏仁核是邊緣系統(tǒng)中重要的皮質(zhì)下核團，在創(chuàng)傷后應激障礙發(fā)病中起重要作用。

海馬是由于海馬神經(jīng)元凋亡，致體積減小，杏仁核和海馬的功能密切相關，海馬的部分功能可由杏仁核的調(diào)節(jié)而實現(xiàn)。神經(jīng)元是構(gòu)成神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。神經(jīng)元具有長突起，由細胞體和細胞突起構(gòu)成。

細胞特性：

1）組織來源于實驗動物的正常腦組織。本細胞為終末分化細胞，增殖能力很弱，建議客戶收到細胞后直接用于后續(xù)實驗，不要進行擴增培養(yǎng)。

2）細胞鑒定：β-tubulin熒光染色為陽性。

3）經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5）細胞生長方式：不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 原代神經(jīng)元細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

兔白細胞介素-35(IL-35)檢測試劑盒

Rat acetylcholine receptor aibody (AChRab) ELISA Kit 大鼠乙酰受體抗體(AChRab)檢測試劑盒

HumanHerpessimplexvirusⅡaibody,HSVⅡ-AbELISAKit 人單皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)檢測試劑盒 進口分裝

Humanglycogensyhasekinase,GSK檢測試劑盒人糖原合成酶激酶(GSK)檢測試劑盒

組織蛋白巰基/結(jié)合巰基含量比色法定量檢測試劑盒20次

Humanmonoamineoxidase,MAOELISAKit人單胺氧化酶(MAO)檢測試劑盒

CD38重組大鼠 SCARB3 蛋白  Protein

FSH(Follicle-stimulating hormone precursor 0.5mgFSH(Follicle-stimulating hormone precursor) 促卵泡刺激素抗原

CAMK2B重組人 CAMK2B / CaMKII-beta 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

AMPK Protein Human 重組人 AMPK (G1/B1/A1) Heterotrimer 蛋白

SPARC Protein Mouse 重組小鼠 Osteonectin / SPARC 蛋白 (His 標簽)

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豬(Dex)ELISA 試劑盒

Human arginase (Arg) ELISA Kit 人精酶(Arg)檢測試劑盒

PorcineangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit 豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)檢測試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAlpha2-AP(RabbitAlpha2-Aiplasmin)ELISAKit兔子α2抗纖溶酶

血液亮(leucine含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次

Mouseβ-hexosaminidaseA,β-HexAELISAKit小鼠β氨基己糖苷酶A(β-HexA)檢測試劑盒

兔杏仁核神經(jīng)元細胞豬白介素12(IL-12/P40)ELISAKit   ELISA.  

豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)ELISAKit   ELISA. 

豬傳染性胃腸病毒抗體(TGEV)ELISAKit   ELISA. 

豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISAKit   ELISA.