產(chǎn)品名稱：COS-7細胞，SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞
產(chǎn)品特點：COS-7細胞，SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞說明書上海一研生物相關(guān)產(chǎn)品：DMEM-F-12 500ml 瓶anti-GST Tag Rabbit Polyclonal antibody 100ul 瓶轉(zhuǎn)氨酶（純酶） 1g 瓶猴IgG干粉 10mg 支Doxorubicin hydrochloride 鹽酸 25mg 瓶羽毛刀片 50片-盒 瓶姬姆薩
產(chǎn)品型號：
更新日期：2021-03-29
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COS-7細胞，SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞的詳細資料：
下列是產(chǎn)品的訂購信息：
產(chǎn)品名稱 | COS-7細胞，SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞說明書 |
英文名稱 | COS-7 cells, SV40 transformation Africa green monkey kidney cells |
貨號 | EY-X64119 |
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備。
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培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
Pfu DNA Polymerase 500U 支
DMEM-F-12 500ml 瓶
anti-GST Tag Rabbit Polyclonal antibody 100ul 瓶
轉(zhuǎn)氨酶（純酶） 1g 瓶
猴IgG干粉 10mg 支
Doxorubicin hydrochloride 鹽酸 25mg 瓶
羽毛刀片 50片-盒 瓶
姬姆薩原液 100ml 瓶
羊抗大鼠IgG（免疫血清） 0.5ML 支
Timosaponin A3 知母皂苷A3 41059-79-4 20mg
O-Diacetyldaurisoline 乙酰蝙蝠葛蘇林堿 10mg
豚鼠臟器組織淋巴細胞分離液試劑盒 200ml/KIT 盒
COS-7細胞，SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞說明書p70S6Kb抗原p70 S6 Kinase/P70 Beta1 0.5mg
癌易感基因相關(guān)蛋白2PALB2(partner and locaizer of BRCA2) 0.5mg
血小板活化因子受體抗原PAFR/PTAFR 0.5mg
磷酸化p21激活激酶4多肽抗原Phospho-PAK4 (Ser99) peptide 0.5mg
激活激酶PAK7/PAK5抗原PAK7/PAK5/MBT 0.5mg
蛋白酶激活受體-2抗原PAR-2 (Protease-activated receptors-2) 0.5mg
蛋白酶激活受體-1抗原PAR-1 (Protease-activated receptors-1) 0.5mg
蛋白酶活化受體4/前列腺細胞凋亡反應(yīng)蛋白4抗原PAR4 (protease-activated receptor 4) 0.5mg
多腺苷二磷酸多聚酶抗原(N端)PARP(poly ADP-ribose polymerase)N-Terminus 0.5mg
配對盒基因8抗原PAX8(Paired box gene 8) 0.5mg
配對盒基因9抗原PAX9(Paired box gene 9) 0.5mg
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
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