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產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Human CNTF protein

產(chǎn)品中文名稱：重組人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（CNTF）

規(guī)格：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

貨號(hào)：EY-01X8635
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):

標(biāo)簽:無(wú)標(biāo)簽

表達(dá)宿主:大腸桿菌

種屬:人

序列:氨基酸序列來(lái)源于：人源 CNTF(P26441)(Ala2-Met200) 表達(dá)的蛋白片段。

蛋白長(zhǎng)度：重組人CNTF由199個(gè)氨基酸組成，預(yù)測(cè)分子量為22 KD。

純度:> 98 % ，使用SDS-PAGE檢測(cè)

采用 LAL 法檢測(cè)，每 1 μg 蛋白質(zhì)中的 EU 含量小于 0.1。

產(chǎn)品形式:凍干粉，凍干緩沖液為無(wú)菌的 PBS，pH 7.5。

基因ID:1270

使用中注意事項(xiàng):開蓋使用前，請(qǐng)先離心。本產(chǎn)品為凍干粉，推薦用該產(chǎn)品配套的Reconstit動(dòng)?動(dòng)

背景

睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（Ciliary neurotrophic factor, CNTF）作為細(xì)胞因子家族成員之一，是一種多功能細(xì)胞因子，其對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化具有明顯的營(yíng)養(yǎng)作用。CNTF廣泛分布于神經(jīng)系統(tǒng)，具有廣譜營(yíng)養(yǎng)作用，如：運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元、感覺(jué)神經(jīng)元、交感神經(jīng)元、副交感神經(jīng)元、海馬神經(jīng)元、少突膠質(zhì)細(xì)胞，可以提高體內(nèi)外各種類型外周神經(jīng)元的存活。

本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

 1.操作簡(jiǎn)便、快捷?？芍苯蛹尤氲綑z測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無(wú)需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無(wú)放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來(lái)溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品：

Argireline peptide 抗皺寡肽-1/六勝肽-3/阿基瑞林/乙酰六勝肽-3 1gArgireline peptide 抗皺寡肽-1/六勝肽-3/阿基瑞林/乙酰六勝肽-3

GAD1 Protein Human 重組人 GAD67 / GAD1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CNDP2重組小鼠 CNDP2 / CN2 / CPGL 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ACVR1 Protein Rat 重組大鼠 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白

GNGT1重組人 GNGT1 / GNG1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

小鼠表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA 試劑盒

Human aspaate aminoansferase / aspaate aminoansferase (GOT/GPT) ELISA Kit 人天門冬轉(zhuǎn)氨酶/谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT/GPT)檢測(cè)試劑盒

Humanmitogenactivitedproteinkinase,MAPKELISAKit 人原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝

Humanbrain-gpeptides,BGP/Gehrelin檢測(cè)試劑盒人腦腸肽(BGP/Gehrelin)檢測(cè)試劑盒

植物組織微粒體分離試劑盒20次

Humanspleeyrosinekinase,SykELISAKit人脾臟酪激酶(Syk)檢測(cè)試劑盒

兔子纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)檢測(cè)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

兔子細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)檢測(cè)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

兔子細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)檢測(cè)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

兔子細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)檢測(cè)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子A(PDGFA)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： PDGFA ELISA Kit

Mouse coagulation factor IX (F IX) ELISA Kit 小鼠Ⅸ(FⅨ)檢測(cè)試劑盒

Mousehepatocytegrowthfactor,HGFELISAkit 小鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumancoagulationfactorVIIIrelatedaigen,FVIII-AgELISAKit人Ⅷ相關(guān)抗原

細(xì)胞CDK5/P25激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitIP-10/CXCL鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10

重組人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（CNTF）CNDP2重組小鼠 CNDP2 / CN2 / CPGL 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

Argireline peptide 抗皺寡肽-1/六勝肽-3/阿基瑞林/乙酰六勝肽-3 1gArgireline peptide 抗皺寡肽-1/六勝肽-3/阿基瑞林/乙酰六勝肽-3

GNGT1重組人 GNGT1 / GNG1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

GAD1 Protein Human 重組人 GAD67 / GAD1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ACVR1 Protein Rat 重組大鼠 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過(guò)PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過(guò)RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過(guò)夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過(guò)夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。