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本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

1.操作簡便、快捷。可直接加入到檢測平板。在96-孔板中檢測時(shí),無需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。

商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Mouse IL-22 Protein, His tag (Animal-Free)

產(chǎn)品中文名稱：重組小鼠白介素22,His標(biāo)簽無動物源IL-22

規(guī)格：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

貨號：EY-01X8862
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢:

表達(dá)宿主:大腸桿菌

種屬:小鼠

序列:氨基酸序列來源于：小鼠源IL-22 (Leu24-Val179) (Q9JJY9)

活性:Measure by its ability to induce IL-10 secretion in COLO205 cells.The ED?? for this effect is <0.3 ng/mL.

蛋白長度：重組人IL-22蛋白由156個(gè)氨基酸組成，預(yù)測分子量為17.58 KD。

純度:> 98 % ，使用SDS-PAGE檢測

通過LAL法測定，每微克蛋白里內(nèi)毒素含動?動

背景

Interleukin 22 (IL-22) is an α-helical cytokine, predicts a molecular mass of 16.9 kDa. It is produced by T-helper (Th)-17 cells, γδ T cells, NKT cells and newly described innate lymphoid cells (ILCs). Effects involve stimulation of cell survival, proliferation and synthesis of antimicrobials including S110, Reg3β, Reg3γ and defensins.

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。

公司正在出售的產(chǎn)品：

CG6856-PA peptide CG6856-PA抗原 0.5mgCG6856-PA peptide CG6856-PA抗原

CAT Protein Human 重組人 CAT / Catalase 蛋白

GHR重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / GHBP 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

IL13RA1 Protein Mouse 重組小鼠 IL-13Ra1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

AKR1A1重組人 AKR1A1 蛋白 Protein

小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai mated ciullinated vimein aibody (MCV) ELISA Kit 人抗突變型瓜波形蛋白抗體(MCV)檢測試劑盒

Human1,5-anhydroglucitol,1,5-AGELISAKit 人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-AG)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforACA-IgM(Humanai-cardiolipinaibodyIgM)ELISAKit人抗心0脂抗體IgM

藥品糖精(saccharin)含量紫外光譜法定量檢測試劑盒20次

Mouseoxidizidedglathione,GSGSELISAKit小鼠氧化型(GSGS)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

鴨白介素1(IL-1)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

鴨γ干擾素(IFN-γ)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

鴨α干擾素(IFN-α)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2(CAMK 2)檢測試劑盒 ，英文名： CAMK 2 ELISA Kit

Pulmonary surfacta associated protein A (SP-A) ELISA Kit 豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)檢測試劑盒

轉(zhuǎn)基因植物EPSPS基因核酸檢測試劑盒 48T

CLIAKitforMCAbELISAKit大鼠黑色素細(xì)胞抗體

體液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)活性熒光定量檢測試劑盒20次

ELISAKitAβ1-40馬β淀粉樣蛋白1-40

重組小鼠白介素22,His標(biāo)簽無動物源IL-22GHR重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / GHBP 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

CG6856-PA peptide CG6856-PA抗原 0.5mgCG6856-PA peptide CG6856-PA抗原

AKR1A1重組人 AKR1A1 蛋白 Protein

CAT Protein Human 重組人 CAT / Catalase 蛋白

IL13RA1 Protein Mouse 重組小鼠 IL-13Ra1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷