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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：兔海綿體內(nèi)皮細胞

英文名稱：Rabbit Cavernous Endothelial Cells

組織來源：海綿體

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

兔海綿體內(nèi)皮分離自海綿體組織；陰莖海綿體是由海綿狀的小梁和腔隙構(gòu)成的血竇結(jié)構(gòu)，它主要包括海綿體內(nèi)皮細胞、平滑肌細胞和成纖維細胞3種細胞成分。其中平滑肌細胞和成纖維細胞鑲嵌于海綿體細胞外基質(zhì)的膠原中，而海綿體內(nèi)皮細胞則覆蓋于海綿體血竇的腔面，僅占海綿體組織的2.8%。在消化海綿體組織時，膠原酶的作用主要是松解海綿體內(nèi)皮細胞與基膜的聯(lián)系，破壞海綿體內(nèi)皮細胞間的緊密連接。如果消化時間延長或膠原酶濃度過大，平滑肌細胞和成纖維細胞也將被消化下來，從而影響海綿體內(nèi)皮細胞的純度。因此，比較篩選合適的膠原酶濃度和消化時間是成功分離海綿體內(nèi)皮細胞的關(guān)鍵。

實驗室分離的兔海綿體內(nèi)皮采用混合酶消化法結(jié)合機械分離法、并用內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的兔海綿體內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：內(nèi)皮細胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔海綿體內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

大鼠雌激素轉(zhuǎn)移酶(SULT1E1)檢測試劑盒 ，英文名： SULT1E1 ELISA Kit

Mouse type III procollagen (P III NP) ELISA Kit 小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)檢測試劑盒

ELISA 小鼠CXC趨化因子受體3(mouse CXCR3)  進口分裝

CLIAKitforLFA-3/CD58(Mouselymphocytefunctionassociatedaigen3)ELISAKit小鼠淋巴細胞功能相關(guān)抗原3

通用型HPV6(HUMANPAPILLOMAVIRUS-6)病毒定性檢測試劑盒20次

ELISAKitET-1內(nèi)皮素1

CD320重組小鼠 CD320 / 8D6A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

角蛋白16(KRT16)重組蛋白 Recombinant Keratin 16 (KRT16)

LILRB1重組人 LILRB1 / CD85 / ILT2 / ILR1 蛋白 Protein

CLU Protein Human 重組人 Clusterin / Apolipoprotein J / Apo-J / CLU 蛋白

PCSK9 Protein Rhesus 重組恒河猴 PCSK9 / NARC1 蛋白

角蛋白16(KRT16)重組蛋白 Recombinant Keratin 16 (KRT16)

CLU Protein Human 重組人 Clusterin / Apolipoprotein J / Apo-J / CLU 蛋白

CD320重組小鼠 CD320 / 8D6A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

PCSK9 Protein Rhesus 重組恒河猴 PCSK9 / NARC1 蛋白

LILRB1重組人 LILRB1 / CD85 / ILT2 / ILR1 蛋白 Protein

小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human immunoreactive growth hormone (irGH) ELISA Kit 人免疫反應(yīng)性生長激素(irGH)檢測試劑盒

Humandesmin,DesELISAKit 人結(jié)蛋白(Des)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Elisa病毒抗體檢測試劑盒5*96孔5*96孔

增強型HRP-DAB底物顯色試劑盒10次

MouseCXC-chemokinereceptor3,CXCR3ELISAKit小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔海綿體內(nèi)皮細胞小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠三0酸腺苷（ATP）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠三腺原酸（T3）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠狀腺原酸(T3)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用