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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：兔真皮微血管內(nèi)皮細胞

英文名稱：Rabbit Dermal Microvascular Endothelial Cells

組織來源：皮膚

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

兔真皮微血管內(nèi)皮分離自真皮組織；真皮，位于表皮深層，向下與皮下組織相連，真皮結締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起，埋于基質內(nèi)。其內(nèi)分布著各種結締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維，使皮膚既有彈性，又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結構組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質。微血管內(nèi)皮細胞（MEC）在炎癥反應、腫瘤生長、創(chuàng)面愈合過程中起著非常重要的作用。在創(chuàng)面愈合研究領域，由于表皮細胞、真皮成纖維細胞體外培養(yǎng)技術的成熟，人們對這兩種細胞早已進行了大量深入的研究。與之相比，對參與創(chuàng)面愈合過程的另一種主要細胞——真皮微血管內(nèi)皮細胞，則因其體外分離培養(yǎng)技術的困難而使相關的研究受限。

實驗室分離的兔真皮微血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法結合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

實驗室分離的兔真皮微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：內(nèi)皮細胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔真皮微血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

大鼠17-α(17-αMT)檢測試劑盒 ，英文名： 17-αMT ELISA Kit

Mouse thyroxine aibody (TAb) ELISA Kit 小鼠甲狀腺素抗體(TAb)檢測試劑盒

MouseBonemorphogeneticprotein6,BMP-6ELISAKit 小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanplatelet-derivedgrowthfactor,PDGFELISAKit人血小板衍生生長因子

通用型總淀粉+直鏈+支鏈淀粉比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitET大鼠內(nèi)毒素

NP重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) Nucleocapsid / NP Protein

phospho-BAD(pSer128 0.5mgphospho-BAD(pSer128) 0酸化相關死亡促進因子抗體

HYOU1重組人 ORP150 / HYOU1 / HSP12A 蛋白 Protein

COL9A1 Protein Human 重組人 COL9A1 蛋白 (Fc 標簽)

CPE Protein Human 重組人 Carboxypeptidase E / CPE 蛋白 (Fc 標簽)

phospho-BAD(pSer128 0.5mgphospho-BAD(pSer128) 0酸化相關死亡促進因子抗體

COL9A1 Protein Human 重組人 COL9A1 蛋白 (Fc 標簽)

NP重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) Nucleocapsid / NP Protein

CPE Protein Human 重組人 Carboxypeptidase E / CPE 蛋白 (Fc 標簽)

HYOU1重組人 ORP150 / HYOU1 / HSP12A 蛋白 Protein

小鼠上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human terminal compleme complex C5b-9 (TCC C5b-9) ELISA Kit 人末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)檢測試劑盒

HumanPeptideγ,PγELISAKit 人γ肽(Pγ)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

GoatPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPK檢測試劑盒山羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母0酸葡萄糖異構酶(phosphoglucoseisomerase;GPI)活性光譜法定量檢測試劑盒20次

MouseClusterofdiffereiation30,CD30ELISAKit小鼠CD30分子(CD30)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔真皮微血管內(nèi)皮細胞小鼠檢測試劑盒   小鼠試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠試劑盒、小鼠檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠牛血清白蛋白檢測試劑盒   小鼠牛血清白蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠牛血清白蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠牛血清白蛋白試劑盒、小鼠牛血清白蛋白檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠牛小腸堿性0酸酶檢測試劑盒   小鼠牛小腸堿性0酸酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠牛小腸堿性0酸酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠牛小腸堿性0酸酶試劑盒、小鼠牛小腸堿性0酸酶檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

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視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用