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細胞簡介：

小鼠腦膜分離自腦膜組織；腦膜是顱骨與腦間的隔膜，一共有三層，由外向內為硬腦膜、蛛網膜和軟腦膜。腦膜細胞圍繞著大腦，參與中樞神經系統(tǒng)的正常發(fā)育，能穩(wěn)定腦軟膜表面的細胞外基質、組織放射狀膠質細胞網絡和小腦皮層分層結構。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠腦膜成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠腦膜成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產品：

大鼠促甲狀腺激素(TSH)檢測試劑盒 ，英文名： TSH ELISA Kit

Mouse procollagen C N-terminal peptide (C I CP) ELISA Kit 小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)檢測試劑盒

ELISA 小鼠皮質酮(mouse Coicosterone)  進口分裝

CLIAKitforLH(Humanleoopichormone)ELISAKit

通用型HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定性檢測試劑盒20次

ELISAKitPF-4/CXCL4血小板因子4

EFNB2重組小鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 Protein

CA125 卵巢癌抗原 0.2mgCA125 卵巢癌抗原

PON3重組人 PON3 / Paraoxonase 3 蛋白 (50 Ser/Asn, His 標簽) Protein

CUTC Protein Human 重組人 CUTC / CGI-32 蛋白

TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白

CA125 卵巢癌抗原 0.2mgCA125 卵巢癌抗原

CUTC Protein Human 重組人 CUTC / CGI-32 蛋白

EFNB2重組小鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 Protein

TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白

PON3重組人 PON3 / Paraoxonase 3 蛋白 (50 Ser/Asn, His 標簽) Protein

小鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human glucose 6 phosphate isomerase (GPI) ELISA Kit 人葡萄糖60酸異構酶(GPI)檢測試劑盒

Humanliverspecificlipoprotein,LSPELISAKit 人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanacidicfibroblastgrowthfactor1,aFGF-1檢測試劑盒人酸性成纖維細胞生長因子1(aFGF-1)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

脂肪肝比色法定量檢測試劑盒

MouseannexinⅤ,ANX-ⅤELISAKit小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠腦膜成纖維細胞小鼠抗單核細胞抗體(AMA)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠抗IVIgG抗體檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。